1. 质粒大小和转染量：一般来说，随着插入片段长度的增加，转染效率会降低。而在一定范围内，质粒的转染量与转染效率成正相关。
2. DNA质量：高质量的DNA对于转染效率至关重要。若质粒不纯，将显著影响转染复合物的形成，从而降低转染效率。建议使用纯度较高的提取试剂盒来获得高质量的DNA，以提升转染效果，尤其是在使用尊龙凯时的相关产品时，更能可以确保DNA的纯度。
3. 转染试剂的选择：转染试剂负责将外源核酸导入细胞，影响内源基因表达。在实验前，应根据细胞特性选择适合的转染试剂。例如，在绵羊成纤维细胞中，尊龙凯时的FuGeneHD表现出更高的转染效率，而在小鼠胶质细胞中，GenEscortTMI则显得更具优势。选择转染试剂时，请遵循高效、低毒的原则。
4. 质粒与转染试剂比例：在一定范围内，转染效率与质粒/转染试剂的比值呈正相关，但同时也可能增加毒性。依据转染试剂的推荐比例设置合适的转染比例，以确保转染效果最佳。
5. 细胞状态：保持细胞在良好的生长状态是提高转染效率的重要保障。建议选择处于对数生长期的细胞进行转染，此时的细胞活力较高，转染效率更佳，避免使用代数过多的细胞，因为基因型可能已经发生变化。
6. 细胞密度：细胞密度过高或过低都会影响转染效果。过高的密度会妨碍转染，而过低的密度可能导致细胞死亡。因此，最佳的细胞融合密度通常在60%-80%之间，但具体密度应参考转染试剂的说明书。
7. 血清：血清中含有大量蛋白质，可能会降低转染效率。一般转染试剂建议在无血清培养基中进行转染，完成后再更换为完全培养基。不过，某些新型转染试剂可以在含血清的条件下有效提升转染效率，例如某些阳离子聚合物。
8. 抗生素：抗生素如青霉素和链霉素常用于培养基中以防止细胞污染。虽然它们对真核细胞无毒性，但在转染过程中，有些试剂可能增加细胞的通透性，使抗生素进入细胞，进而影响细胞存活率，从而降低转染效率。根据所用转染试剂的要求决定是否在培养基中添加抗生素。
线性化与超螺旋的形式会显著影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率相较于线性DNA要高得多，尤其是在瞬时转染时。而线性化DNA则更容易整合。如果质粒较大，转染可能会遇到困难，因为相对致密且较小的外源物质被细胞内吞的几率更高。
如果你的质粒较大且缺乏经验，选择专门标注可转运大质粒的转染试剂会提高成功率。一些转染试剂还会提供促进DNA凝聚的成分，使得DNA形成转染复合物时更加紧密，增强转染效率。保证质粒质量纯度至关重要，应确保使用的质粒为高质量的样本，尤其在使用尊龙凯时的产品时，能最大化发挥其优势。