cfDNA(游离DNA)指的是细胞外存在的DNA,可以在多种生物体液中找到,包括血液、唾液和尿液等。cfDNA的主要来源于细胞凋亡、坏死或主动分泌等过程释放的DNA片段。在血液中,cfDNA主要存在于血浆或血清中,与血细胞等成分分开。此外,cfDNA还可在脑脊液、胸腔积液和腹水等其他生物体液中被检测到。
通过使用酚、氯仿等有机溶剂的不同溶解性,cfDNA的提取可以分为几个步骤:先将蛋白质等杂质溶解到有机相中,而DNA则留在水相中。此后,通过乙醇沉淀等步骤获得纯化的cfDNA。该方法的优点在于DNA的纯度较高,但操作流程繁琐且需要使用有毒的有机溶剂,对实验操作人员的技术要求也相对较高。
另一种提取cfDNA的方法是利用磁珠的特异性吸附作用。在特定的缓冲液中,磁珠可以选择性地吸附cfDNA,通过外加磁场将其与其他杂质分离。该方法快捷、简便,适合自动化操作,且提取效率高,可同时处理多个样本。
利用硅胶膜在特定条件下对DNA的吸附特性,将生物样本中的cfDNA吸附到硅胶膜上,之后清洗去除杂质,最后通过适当的洗脱液将cfDNA从膜上洗脱下来。此方法操作简单,成本较低,适合小规模样本提取。
不同生物体液中的cfDNA含量和性质有所不同。总体来说,血液中的cfDNA含量较高,是最常用的样本来源。然而,不同个体和疾病状态下,血液中的cfDNA含量会有所变化。样本采集后,如果无法及时提取,保存条件至关重要。例如,血液样本一般需要在4℃下保存,超过一定时间或温度不当可能会导致cfDNA降解,从而影响提取效果。
在处理样本数量较少或特殊珍贵样本时,通常倾向于采用回收柱技术。相对较多的样本批量处理时,则更推荐使用磁珠法,以降低人工成本和人为误差。
尊龙凯时的TD476产品采用独特的回收柱技术进行游离DNA的提取与回收,支持传统离心法和真空多联器与真空泵的结合使用,省去繁琐的离心步骤,可以在较短时间内处理大样本量。而TB476则使用磁珠法提取纯化游离DNA,能够根据客户需求提供兼容磁力架的试剂盒,满足高通量提取的需求。
【使用介绍】
【产品特性】
尊龙凯时的产品以其高纯度、快速便捷的特点,广泛适用于测试与研究中的cfDNA提取,为科研提供坚实的支持。