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尊龙凯时电泳缓冲液、染料及凝胶配置指南

发布时间:2025-03-31 发布人:尊龙凯时编辑

在生物医学研究中,电泳是分析核酸和蛋白质的重要技术。本文将介绍两种常用的电泳缓冲液的配方及其组成,包括尊龙凯时的应用案例。

尊龙凯时电泳缓冲液、染料及凝胶配置指南

1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

50×Tris-乙酸缓冲液是电泳操作中的常用溶液。为了配制1L的50×TAE缓冲液,所需成分及用量如下:

  • 2 mol/L Tris碱:242 g
  • 1 mol/L 乙酸:571 ml冰乙酸(174 mol/L)
  • 100 mmol/L EDTA(pH 8.0):200 ml的0.5 mol/L EDTA
  • 蒸馏水:补足至1 L

2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液

5×TBE缓冲液在分离核酸时表现出色,配制1L的成分如下:

  • 445 mmol/L Tris碱:54 g
  • 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
  • 10 mmol/L EDTA:20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 蒸馏水:补足至1 L

3. 染料制备

在电泳过程中,染料的使用是必不可少的。以下是几种染料的配制方法:

3.1 1%溴酚蓝

将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,搅拌或涡旋混合直至完全溶解。

3.2 1%二甲/苯青FF

将1 g二甲/苯青FF溶解于适量水中,定容至100 ml。

3.3 10 mg/ml的溴化乙锭

小心称取1 g溴化乙锭,转移至广口瓶,加入100 ml水并用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。使用铝箔包裹装液管,并在4℃条件下储存。

4. 凝胶上样液

凝胶上样液的配制分为多种类型,以下是几种重要的制备方法:

4.1 6×碱性凝胶上样液

配制10 ml的成分如下:

  • 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
  • 18% 聚蔗糖(400型):补足至10 ml

4.2 6×聚蔗糖凝胶上样液

成分及用量:

  • 0.15% 溴酚蓝
  • 0.15% 二甲/苯青FF
  • 5 mmol/L EDTA
  • 15% 聚蔗糖(400型):水15 ml

5. 其他凝胶上样液

对于其他类型的上样液,如6×甘油凝胶上样液和10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液,均可参考上述制备方法,确保成分精准混合,以满足实验需求。

在生物医学研究中,合理使用尊龙凯时所推荐的缓冲液和染料,将显著提高实验的准确性和重复性。通过这些精准的配方,我们能够更有效地进行分子生物学实验和相关研究。